Висцерална лајшманијаза (ВЛ), позната као кала-азар на Индијском потконтиненту, је паразитска болест коју изазива флагелирани протозоан Leishmania, а која може бити фатална ако се не лечи брзо. Пешчана мушица Phlebotomus argentipes је једини потврђени вектор ВЛ у југоисточној Азији, где се контролише резидуалним прскањем у затвореном простору (IRS), синтетичким инсектицидом. Употреба ДДТ-а у програмима сузбијања ВЛ довела је до развоја резистенције код пешчаних мушица, па је ДДТ замењен инсектицидом алфа-циперметрином. Међутим, алфа-циперметрин делује слично ДДТ-у, па се ризик од резистенције код пешчаних мушица повећава под стресом изазваним поновљеним излагањем овом инсектициду. У овој студији, проценили смо осетљивост дивљих комараца и њиховог F1 потомства користећи биолошку анализу у бочици CDC-а.
Сакупили смо комарце из 10 села у округу Музафарпур у Бихару, Индија. Осам села је наставило да користи високо-потентне препарате.циперметринЗа прскање у затвореном простору, једно село је престало да користи циперметрин високе концентрације за прскање у затвореном простору, а једно село никада није користило циперметрин високе концентрације за прскање у затвореном простору. Сакупљени комарци су били изложени унапред дефинисаној дијагностичкој дози током одређеног времена (3 μг/мл током 40 минута), а стопа уништавања и морталитет су забележени 24 сата након излагања.
Стопа убијања дивљих комараца кретала се од 91,19% до 99,47%, а код њихових F1 генерација од 91,70% до 98,89%. Двадесет четири сата након излагања, смртност дивљих комараца кретала се од 89,34% до 98,93%, а код њихове F1 генерације од 90,16% до 98,33%.
Резултати ове студије указују да се код P. argentipes може развити отпорност, што указује на потребу за континуираним праћењем и будношћу како би се одржала контрола након што се постигне искорењивање.
Висцерална лајшманијаза (ВЛ), позната као кала-азар на Индијском потконтиненту, је паразитска болест коју изазива флагелирани протозоан Leishmania, а преноси се уједом заражених женки пешчаних мушица (Diptera: Myrmecophaga). Пешчане мушице су једини потврђени вектор ВЛ у југоисточној Азији. Индија је близу постизања циља елиминације ВЛ. Међутим, да би се одржале ниске стопе инциденције након искорењивања, кључно је смањити популацију вектора како би се спречио потенцијални пренос.
Сузбијање комараца у југоисточној Азији постиже се прскањем резидуалним инсектицидима у затвореном простору (IRS) употребом синтетичких инсектицида. Тајно понашање сребрноногих комараца у мировању чини их погодном метом за сузбијање инсектицида прскањем резидуалним инсектицидима у затвореном простору [1]. Прскање резидуалним инсектицидима дихлордифенилтрихлоретаном (ДДТ) у затвореном простору у оквиру Националног програма за контролу маларије у Индији имало је значајне ефекте преливања у контроли популација комараца и значајном смањењу случајева маларије [2]. Ова непланирана контрола маларије подстакла је индијски програм за искорењивање маларије да усвоји прскање резидуалним инсектицидима у затвореном простору као примарну методу сузбијања маларије. Године 2005, владе Индије, Бангладеша и Непала потписале су меморандум о разумевању са циљем елиминисања маларије до 2015. године [3]. Напори за искорењивање, који укључују комбинацију контроле вектора и брзе дијагнозе и лечења људских случајева, имали су за циљ улазак у фазу консолидације до 2015. године, циљ који је касније ревидиран на 2017, а затим 2020. годину. [4] Нови глобални план за елиминацију занемарених тропских болести укључује елиминацију маларије до 2030. године. [5]
Како Индија улази у фазу након ерадикације БЦВД-а, неопходно је осигурати да се не развије значајна резистенција на бета-циперметрин. Разлог за резистенцију је тај што и ДДТ и циперметрин имају исти механизам деловања, наиме, циљају VGSC протеин [21]. Стога, ризик од развоја резистенције код пешчаних мушица може бити повећан стресом изазваним редовним излагањем веома снажном циперметрину. Стога је неопходно пратити и идентификовати потенцијалне популације пешчаних мушица отпорне на овај инсектицид. У том контексту, циљ ове студије био је праћење статуса осетљивости дивљих пешчаних мушица користећи дијагностичке дозе и трајање излагања које су одредили Чаубеј и др. [20] проучавали су P. argentipes из различитих села у округу Музафарпур у Бихару, Индија, која су континуирано користила системе за прскање у затвореном простору третиране циперметрином (села са континуираним IPS-ом). Статус осетљивости дивљег P. argentipes из села која су престала да користе системе за прскање у затвореном простору третиране циперметрином (бивша IPS села) и оних која никада нису користила системе за прскање у затвореном простору третиране циперметрином (села која нису IPS села) упоређен је коришћењем биолошког теста у бочици CDC-а.
За студију је одабрано десет села (Сл. 1; Табела 1), од којих је осам имало историју континуираног прскања синтетичким пиретроидима (хиперметрин; означена као села са континуираним хиперметрином) и имало је случајеве вирусне инфекција (барем један случај) у последње 3 године. Од преостала два села у студији, једно село које није спроводило прскање бета-циперметрином у затвореном простору (село које није спроводило прскање у затвореном простору) изабрано је као контролно село, а друго село које је имало повремено прскање бета-циперметрином у затвореном простору (село са повременим прскањем у затвореном простору/бивше село са прскањем у затвореном простору) изабрано је као контролно село. Избор ових села заснован је на координацији са Одељењем за здравство и Тимом за прскање у затвореном простору и валидацији Микро акционог плана за прскање у затвореном простору у округу Музафарпур.
Географска карта округа Музафарпур која приказује локације села обухваћених студијом (1–10). Локације студије: 1, Манифулкаха; 2, Рамдас Маџаули; 3, Мадхубани; 4, Анандпур Харуни; 5, Пандеј; 6, Хирапур; 7, Мадхопур Хазари; 8, Хамидпур; 9, Нунфара; 10, Симара. Мапа је припремљена коришћењем QGIS софтвера (верзија 3.30.3) и Open Assessment Shapefile-а.
Боце за експерименте излагања припремљене су према методама Шобеја и др. [20] и Денлингера и др. [22]. Укратко, стаклене боце од 500 мл су припремљене један дан пре експеримента, а унутрашњи зид боца је премазан назначеним инсектицидом (дијагностичка доза α-циперметрина била је 3 μг/мл) наношењем ацетонског раствора инсектицида (2,0 мл) на дно, зидове и поклопац боца. Свака боца је затим сушена на механичком ваљку 30 минута. Током овог времена, полако одврните поклопац да би ацетон испарио. Након 30 минута сушења, уклоните поклопац и ротирајте боцу док сав ацетон не испари. Боце су затим остављене отворене да се суше преко ноћи. За сваки поновљени тест, једна боца, која се користила као контрола, премазана је са 2,0 мл ацетона. Све боце су поново коришћене током експеримената након одговарајућег чишћења према поступку који су описали Денлингер и др. и Светска здравствена организација [22, 23].
Дан након припреме инсектицида, 30–40 дивљих уловљених комараца (изгладњелих женки) уклоњено је из кавеза у бочицама и нежно дувано у сваку бочицу. Приближно исти број мува коришћен је за сваку бочицу обложену инсектицидом, укључујући и контролну. Поновите ово најмање пет до шест пута у сваком селу. Након 40 минута излагања инсектициду, забележен је број оборених мува. Све муве су ухваћене механичким аспиратором, стављене у картонске посуде величине пола литре прекривене фином мрежицом и стављене у посебан инкубатор под истим условима влажности и температуре са истим извором хране (вате натопљене 30% раствором шећера) као и нетретиране колоније. Морталитет је забележен 24 сата након излагања инсектициду. Сви комарци су сецирани и прегледани да би се потврдио идентитет врсте. Исти поступак је спроведен са потомцима мува F1 генерације. Стопе оборених комараца и смртности забележене су 24 сата након излагања. Ако је морталитет у контролним бочицама био < 5%, није вршена корекција смртности у понављањима. Ако је морталитет у контролној бочици био ≥ 5% и ≤ 20%, морталитет у тест бочицама тог понављања је коригован коришћењем Аботове формуле. Ако је морталитет у контролној групи прешао 20%, цела тест група је одбачена [24, 25, 26].
Просечна смртност комараца P. argentipes ухваћених у дивљини. Грешке представљају стандардне грешке средње вредности. Пресек две црвене хоризонталне линије са графиконом (морталитет од 90% и 98%) означава прозор морталитета у коме се може развити отпорност.[25]
Просечна смртност потомства F1 генерације дивље уловљене врсте P. argentipes. Грешке представљају стандардне грешке средње вредности. Криве које пресецају две црвене хоризонталне линије (морталитет од 90% и 98%, респективно) представљају опсег морталитета у коме се може развити отпорност [25].
Утврђено је да су комарци у контролном/не-IRS селу (Манифулкаха) били веома осетљиви на инсектициде. Просечна смртност (±SE) дивљих комараца 24 сата након обарања и излагања била је 99,47 ± 0,52% и 98,93 ± 0,65%, респективно, а просечна смртност F1 потомства била је 98,89 ± 1,11% и 98,33 ± 1,11%, респективно (Табеле 2, 3).
Резултати ове студије указују да сребрноноге пешчане мушице могу развити отпорност на синтетички пиретроид (СП) α-циперметрин у селима где се пиретроид (СП) α-циперметрин рутински користио. Насупрот томе, утврђено је да су сребрноноге пешчане мушице сакупљене из села која нису обухваћена програмом контроле/Пореске управе САД (IRS) веома осетљиве. Праћење осетљивости популација дивљих пешчаних мушица је важно за праћење ефикасности коришћених инсектицида, јер ове информације могу помоћи у управљању отпорношћу на инсектициде. Високи нивои отпорности на ДДТ редовно су пријављивани код пешчаних мушица из ендемских подручја Бихара због историјског селекционог притиска IRS-а који користи овај инсектицид [1].
Утврдили смо да је P. argentipes веома осетљив на пиретроиде, а теренска испитивања у Индији, Бангладешу и Непалу показала су да IRS има високу ентомолошку ефикасност када се користи у комбинацији са циперметрином или делтаметрином [19, 26, 27, 28, 29]. Недавно су Рој и др. [18] известили да је P. argentipes развио отпорност на пиретроиде у Непалу. Наша студија осетљивости на терену показала је да су сребрноноге пешчане мушице сакупљене из села која нису била изложена IRS-у биле веома осетљиве, али су мушице сакупљене из села са повременим/бившим IRS-ом и села са континуираним IRS-ом (морталитет се кретао од 90% до 97%, осим пешчаних мушица из Анандпур-Харунија које су имале морталитет од 89,34% 24 сата након излагања) вероватно биле отпорне на високо ефикасан циперметрин [25]. Један од могућих разлога за развој ове резистенције је притисак који врше рутинско прскање у затвореном простору (IRS) и локални програми прскања засновани на случајевима, који су стандардне процедуре за управљање епидемијама кала-азара у ендемским подручјима/блоковима/селима (Стандардна оперативна процедура за истраживање и управљање епидемијама [30]. Резултати ове студије пружају ране индикације развоја селективног притиска на високо ефикасан циперметрин. Нажалост, историјски подаци о осетљивости за овај регион, добијени коришћењем биолошког теста у бочици CDC-а, нису доступни за поређење; све претходне студије су пратиле осетљивост P. argentipes користећи папир импрегниран инсектицидом СЗО. Дијагностичке дозе инсектицида у тест тракама СЗО су препоручене идентификационе концентрације инсектицида за употребу против вектора маларије (Anopheles gambiae), а оперативна применљивост ових концентрација на пешчане мушице није јасна јер пешчане мушице лете ређе од комараца и проводе више времена у контакту са супстратом у биолошком тесту [23].
Синтетички пиретроиди се користе у ендемским подручјима Непала за вирусну лајшманитис од 1992. године, наизменично са специфичним супстанцама алфа-циперметрином и ламбда-цихалотрином за сузбијање пешчаних мушица [31], а делтаметрин се такође користи у Бангладешу од 2012. године [32]. Фенотипска резистенција је откривена код дивљих популација сребрноногих пешчаних мушица у подручјима где се синтетички пиретроиди користе већ дуго времена [18, 33, 34]. Несинонимна мутација (L1014F) је откривена код дивљих популација индијске пешчане мушице и повезана је са резистенцијом на ДДТ, што сугерише да резистенција на пиретроиде настаје на молекуларном нивоу, јер и ДДТ и пиретроид (алфа-циперметрин) циљају исти ген у нервном систему инсеката [17, 34]. Стога је систематска процена осетљивости на циперметрин и праћење резистенције комараца неопходни током периода искорењивања и након искорењивања.
Потенцијално ограничење ове студије је то што смо користили CDC бочицу са биолошким тестом за мерење осетљивости, али сва поређења су користила резултате из претходних студија које су користиле WHO комплет за биолошке тестове. Резултати два биолошка теста можда нису директно упоредиви јер CDC бочица са биолошким тестом мери смањење ефикасности на крају дијагностичког периода, док WHO комплет за биолошке тестове мери морталитет 24 или 72 сата након излагања (ово друго за споро делујућа једињења) [35]. Још једно потенцијално ограничење је број IRS села у овој студији у поређењу са једним селом које није IRS и једним селом које није IRS/бивши IRS. Не можемо претпоставити да је ниво осетљивости комараца вектора примећен у појединачним селима у једном округу репрезентативан за ниво осетљивости у другим селима и окрузима у Бихару. Како Индија улази у фазу након елиминације вируса леукемије, императив је спречити значајан развој резистенције. Потребно је брзо праћење резистенције у популацијама пешчаних мушица из различитих округа, блокова и географских подручја. Подаци представљени у овој студији су прелиминарни и требало би да се провере поређењем са идентификационим концентрацијама које је објавила Светска здравствена организација [35] како би се добила прецизнија представка о статусу осетљивости P. argentipes у овим подручјима пре него што се модификују програми сузбијања вектора како би се одржале ниске популације пешчаних мушица и подржала елиминација вируса леукемије.
Комарац P. argentipes, вектор вируса леукозе, може почети да показује ране знаке отпорности на високо ефикасан циперметрин. Редовно праћење отпорности на инсектициде у дивљим популацијама P. argentipes је неопходно како би се одржао епидемиолошки утицај интервенција сузбијања вектора. Ротација инсектицида са различитим механизмима деловања и/или евалуација и регистрација нових инсектицида је неопходна и препоручује се за управљање отпорношћу на инсектициде и подршку елиминацији вируса леукозе у Индији.
Време објаве: 17. фебруар 2025.