Серија пилот испитивања у колибама спроведена је у Кхову, јужни Бенин, како би се проценила биолошка ефикасност нових и теренских тестираних мрежа за комарце нове генерације против вектора маларије отпорних на пиретрин. Мреже старе у пољу су уклоњене из домаћинстава након 12, 24 и 36 месеци. Комади веба исечени из целих ИТН-ова анализирани су на хемијски састав и биолошки тестови осетљивости су спроведени током сваког испитивања да би се процениле промене у отпорности на инсектициде у популацији вектора Кхове.
Интерцептор® Г2 је надмашио друге ИТН-ове, потврђујући супериорност пиретроидних и хлорфенапирних мрежа у односу на друге врсте мрежа. Међу новим производима, сви ИТН-ови следеће генерације показали су бољу биоефикасност од Интерцептора®; међутим, величина овог побољшања је смањена након старења на терену због краће трајности не-пиретроидних једињења. Ови резултати наглашавају потребу да се побољша инсектицидна постојаност ИТН-а следеће генерације.
Инсектицид-третиране мреже против комараца (ИТН) су одиграле кључну улогу у смањењу обољевања и морталитета од маларије у последњих 20 година. Од 2004. године, више од 3 милијарде ИТН-а је дистрибуирано широм света, а студије моделовања сугеришу да је 68% случајева маларије у подсахарској Африци спречено између 2000. и 2015. године. Нажалост, отпорност популација вектора маларије на пиретроиде (стандардна класа инсектицида који се користе у ИТН) значајно се повећала, угрожавајући ефикасност ове суштинске интервенције. У исто време, напредак у контроли маларије је успорен на глобалном нивоу, при чему су бројне земље са високим оптерећењем забележиле пораст случајева маларије од 2015. године. Ови трендови су покренули развој нове генерације иновативних ИТН производа који имају за циљ да се изборе са претњом отпорности на пиретроиде и помогну у смањењу овог терета и постизању амбициозних глобалних циљева.
Тренутно постоје три ИТН-а нове генерације на тржишту, од којих сваки комбинује пиретроид са другим инсектицидом или синергистом који може да превазиђе отпорност на пиретроиде код вектора маларије. Последњих година, спроведено је више кластер рандомизованих контролисаних испитивања (РЦТ) како би се проценила епидемиолошка ефикасност ових мрежа у поређењу са стандардним мрежама које садрже само пиретроид и да би се обезбедили неопходни докази за подршку препорукама Светске здравствене организације (СЗО). Мреже за кревете које комбинују пиретроиде са пиперонил бутоксидом (ПБО), синергистом који побољшава ефикасност пиретроида инхибирањем ензима за детоксикацију комараца, биле су прве које је препоручила СЗО након што су два производа (Олисет® Плус и ПермаНет® 3.0) показала супериорни утицај на епидемиолошку епидемиологију. рандомизована контролисана испитивања у Танзанији и Уганди. Међутим, потребно је више података да би се одредила јавноздравствена вредност пиретроид-ПБО мрежа за кревет у западној Африци, где тешка резистенција на пиретроид може смањити њихове предности у поређењу са мрежама за кревет само са пиретроидима.
Инсектицидна постојаност ИТН-а се обично процењује периодичним прикупљањем мрежа из заједница и њиховим тестирањем у лабораторијским биолошким тестовима коришћењем сојева комараца узгајаних од инсеката. Иако су ови тестови корисни за карактеризацију биорасположивости и ефикасности инсектицида на површини мрежа за кревет током времена, они пружају ограничене информације о упоредној ефикасности различитих типова мрежа за кревет следеће генерације, јер методе и сојеви комараца који се користе морају бити прилагођени начину деловања инсектицида које садрже. Експериментални тест колиба је алтернативни приступ који се може користити за упоредну процену ефикасности мрежа третираних инсектицидима у студијама трајности у условима који опонашају природне интеракције између дивљих домаћина комараца и кућних мрежа током употребе. Заиста, недавне студије моделирања које користе ентомолошке сурогате за епидемиолошке податке показале су да се смртност комараца и стопе храњења измерене у овим испитивањима могу користити за предвиђање утицаја ИТН-а на учесталост и преваленцију маларије у кластер РЦТ-има. Стога, експериментална испитивања у колибама у којима су лимфни чворови третирани на терену сакупљени инсектицидима укључени у кластер РЦТ могу пружити драгоцене податке о компаративној биоефикасности и инсектицидној постојаности лимфних чворова третираних инсектицидима током њиховог очекиваног животног века, и помоћи у тумачењу ових епидемиолошких резултата.
Експериментални тест колиба је стандардизовано симулирано људско становање које препоручује Светска здравствена организација за процену ефикасности мрежа против комараца третираних инсектицидима. Ови тестови реплицирају услове изложености у стварном свету са којима се домаћини комараца сусрећу приликом интеракције са мрежама за кревет у домаћинству и стога су веома одговарајући приступ за процену биолошке ефикасности коришћених мрежа за кревет током њиховог очекиваног радног века.
Ова студија је проценила ентомолошку ефикасност три различите врсте инсектицидних мрежа против комараца нове генерације (ПермаНет® 3.0, Роиал Гуард® и Интерцептор® Г2) у теренским условима у експерименталним шталама и упоредила их са стандардном мрежом само од пиретрина (Интерцептор®). Све ове мреже против комараца третиране инсектицидима су укључене у преквалификовану листу СЗО за контролу вектора. Детаљне карактеристике сваке мреже против комараца су наведене у наставку:
У марту 2020. спроведена је велика кампања дистрибуције мрежа за комарце старих на пољу у селима колиба у префектури Зоу, јужни Бенин, за пилот испитивања у колибама. Мреже за кревет Интерцептор®, Роиал Гуард® и Интерцептор® Г2 су одабране из насумично одабраних кластера у општинама Кове, Загнанадо и Оуинхи као део опсервационе студије издржљивости угнежђене у оквиру РЦТ кластера како би се проценила епидемиолошка ефикасност двоструких мрежа за кревет третираних инсектицидима. Мреже за комарце ПермаНет® 3.0 сакупљене су у селу Авоканзун у близини општина Јија и Бохикон (7°20′ Н, 1°56′ Е) и дистрибуиране истовремено са РЦТ мрежама против комараца током масовне кампање Националног програма контроле маларије 2020. Слика 1 приказује локације студијских кластера/села где су прикупљени различити типови ИТН у односу на локације експерименталних колиба.
Спроведено је пилот испитивање у колибама да би се упоредио ентомолошки учинак Интерцептор®, ПермаНет® 3.0, Роиал Гуард® и Интерцептор® Г2 ИТН када су уклоњени из домаћинстава 12, 24 и 36 месеци након дисеминације. У свакој годишњој временској тачки, учинак старих ИТН-ова на терену је упоређиван са новим, некоришћеним мрежама сваке врсте и нетретираним мрежама као негативна контрола. У свакој годишњој временској тачки, укупно 54 поновљена узорка ИТН-ова старих на терену и 6 нових ИТН-а сваког типа тестирано је у 1 или 2 поновљена испитивања у колибама са дневном ротацијом третмана. Пре сваког испитивања у колибама, просечан индекс порозности старих пољских мрежа сваког типа ИТН мерен је према препорукама СЗО. Да би се симулирало хабање од свакодневне употребе, све нове ИТН и необрађене контролне мреже су перфориране са шест рупа величине 4 к 4 цм: две у свакој дугој бочној плочи и једна у свакој краткој бочној плочи, у складу са препорукама СЗО. Мрежа против комараца је постављена унутар колибе везивањем ивица кровних лимова конопцима за ексере у горњим угловима зидова колибе. Следећи третмани су процењени у сваком испитивању колибе:
Мреже старе у пољу су процењене у огледним колибама исте године када су мреже уклоњене. Пробе колиба су спроведене на истом месту од маја до септембра 2021, од априла до јуна 2022 и од маја до јула 2023, са мрежама уклоњеним након 12, 24, односно 36 месеци. Свако испитивање је трајало један комплетан циклус третмана (54 ноћи током 9 недеља), осим 12 месеци, када су спроведена два узастопна циклуса третмана да би се повећала величина узорка комараца. Пратећи дизајн латинског квадрата, третмани су ротирани недељно између експерименталних колиба како би се контролисали ефекти локације колиба, док су волонтери ротирани свакодневно да би се контролисале разлике у атрактивности комараца код појединачних домаћина. Комарци су сакупљани 6 дана у недељи; 7. дана, пре следећег циклуса ротације, колибе су очишћене и проветрене да би се спречила зараза.
Примарне крајње тачке ефикасности за експериментални третман у колибама против комараца Анопхелес гамбиае отпорних на пиретроиде и поређење ИТН следеће генерације са Интерцептор® мрежом која садржи само пиретроиде биле су:
Секундарне крајње тачке ефикасности за експериментални третман у колибама против комараца Анопхелес гамбиае отпорних на пиретроид биле су следеће:
Задржавање (%) – смањење стопе уласка у третирану групу у поређењу са нетретираном групом. Обрачун је следећи:
где је Ту број комараца укључених у нетретирану контролну групу, а Тт број комараца укључених у третирану групу.
Стопа осипања (%) – Стопа осипања услед потенцијалне иритације услед третмана, изражена као пропорција комараца сакупљених на балкону.
. Коефицијент сузбијања сисања крви (%) је смањење пропорције комараца сисања крви у третираној групи у поређењу са нетретираном контролном групом. Метод прорачуна је следећи: где је Бфу удео комараца крвопија у нетретираној контролној групи, а Бфт је удео комараца крвосиса у третираној групи.
Смањење плодности (%) — смањење удела фертилних комараца у третираној групи у поређењу са нетретираном контролом. Метод прорачуна је следећи: где је Фу удео плодних комараца у нетретираној контролној групи, а Фт удео плодних комараца у третираној групи.
Да би пратила промене у профилу резистенције популација вектора Цове током времена, СЗО је спровела ин витро и биолошке тестове у бочици у истој години сваког експерименталног испитивања у колибама (2021, 2022, 2023) како би проценила подложност АИ у ИТН-овима који се проучавају и да информише интерпретацију резултата. У ин витро студијама, комарци су били изложени филтер папирима третираним са дефинисаним концентрацијама алфа-циперметрина (0,05%) и делтаметрина (0,05%), као и боцама обложеним дефинисаним концентрацијама ЦФП (100 μг/боца) и ППФ (100 μг/боца) да би се проценила њихова отпорност на осетљивост. Интензитет пиретроидне резистенције испитиван је излагањем комараца 5-струким (0,25%) и 10-струким (0,50%) диференцијалним концентрацијама α-циперметрина и делтаметрина. Коначно, допринос ПБО синергије и прекомерне експресије монооксигеназе цитокрома П450 (П450) отпорности на пиретроиде је процењен пре-излагањем комараца диференцијалним концентрацијама α-циперметрина (0,05%) и делтаметрина (0,05%) и пре-излагањем ПБО (4%). Филтер папир који се користи за СЗО тест са епруветом купљен је од Университи Саинс Малесиа. Бочице за биолошки тест СЗО коришћењем ЦФП и ППФ припремљене су у складу са препорукама СЗО.
Комарци који се користе за биотестове сакупљени су у фази ларве са места за размножавање у близини експерименталних колиба, а затим одгајани одраслима. У свакој временској тачки, најмање 100 комараца је било изложено сваком третману током 60 минута, са 4 понављања по туби/боци и приближно 25 комараца по туби/боци. За излагање пиретроидима и ЦФП-у коришћени су нехрањени комарци стари 3–5 дана, док су за ППФ коришћени комарци који сишу крв од 5–7 дана да би се стимулисала оогенеза и проценио ефекат ППФ-а на репродукцију комараца. Паралелне експозиције су спроведене коришћењем филтер папира импрегнираног силиконским уљем, чистог ПБО (4%) и боца обложених ацетоном као контрола. На крају експозиције, комарци су пребачени у необрађене контејнере и изложени памучној вуни натопљеној у 10% (в/в) раствору глукозе. Смртност је забележена 24 х након излагања пиретроидима и свака 24 х током 72 х након излагања ЦФП-у и ППФ-у. Да би се проценила осетљивост на ППФ, преживели комарци изложени ППФ-у и одговарајуће негативне контроле су сецирани након што је забележена одложена смртност, развој јајника је примећен помоћу сложеног микроскопа, а плодност је процењена према Цхристопхерсовом стадијуму развоја јајашца [28, 30]. Ако су се јаја у потпуности развила до Кристоферовог стадијума В, комарци су класификовани као плодни, а ако јаја нису била у потпуности развијена и остала у фазама И–ИВ, комарци су класификовани као стерилни.
У свакој временској тачки године, комади величине 30 × 30 цм су исечени из нових и старих мрежа на локацијама наведеним у препорукама СЗО [22]. Након сечења, мреже су обележене, умотане у алуминијумску фолију и чуване у фрижидеру на 4 ± 2 °Ц да би се спречила миграција АИ у тканину. Мреже су затим послате у Валонски центар за пољопривредна истраживања у Белгији на хемијску анализу како би се измериле промене у укупном садржају вештачке интелигенције током њиховог радног века. Коришћене аналитичке методе (засноване на методама које препоручује Међународни кооперативни комитет за анализу пестицида) су претходно описане [25, 31].
За податке експерименталног испитивања у колибама, укупан број живих/мртвих, који гризу/не уједају и плодних/стерилних комараца у различитим одељцима колиба је збир за сваки третман у сваком испитивању да би се израчунали различити пропорционални исходи (72-часовни морталитет, уједање, ектопаразитизам, њихов нето-паразитизам, нето 9% конфесионалне конфесије). интервали (ЦИ). Разлике између третмана за ове пропорционалне бинарне исходе анализиране су коришћењем логистичке регресије, док су разлике за исходе бројања анализиране коришћењем негативне биномне регресије. Пошто су два циклуса ротације третмана спроведена сваких 12 месеци и неки третмани су тестирани у свим испитивањима, анализе пенетрације комараца су прилагођене за број дана у којима је сваки третман тестиран. Нови ИТН за сваки исход је такође анализиран да би се добила једна процена за све временске тачке. Поред главне објашњавајуће варијабле третмана, сваки модел је укључивао колибу, спавач, пробни период, ИТН индекс отвора и дан као фиксне ефекте за контролу варијација због разлика у индивидуалној атрактивности спавача и колибе, сезоналности, статуса мреже против комараца и вишка дисперзије. Регресионе анализе су произвеле прилагођене односе шанси (ОР) и одговарајуће интервале поверења од 95% да би се проценио ефекат ИТН нове генерације у поређењу са мрежом која садржи само пиретроиде, Интерцептор®, на примарне исходе морталитета и плодности комараца. П вредности из модела су такође коришћене за додељивање компактних слова која указују на статистичку значајност на нивоу од 5% за сва поређења у пару примарних и секундарних исхода. Све регресионе анализе су обављене у Стата верзији 18.
Осјетљивост популација вектора Цовесеа тумачена је на основу морталитета и плодности уочених ин витро и биолошких тестова у бочици према препорукама Свјетске здравствене организације. Резултати хемијске анализе дали су укупан садржај АИ у ИТН фрагментима, који је коришћен за израчунавање стопе задржавања АИ у мрежама старим у пољу у поређењу са новим мрежама у свакој временској тачки сваке године. Сви подаци су ручно забележени на стандардизованим обрасцима, а затим дупло унети у Мицрософт Екцел базу података.
Етички комитети Министарства здравља Бенина (бр. 6/30/МС/ДЦ/ДРФМТ/ЦНЕРС/СА), Лондонске школе за хигијену и тропску медицину (ЛСХТМ) (бр. 16237) и Светске здравствене организације (бр. ЕРЦ.0003153) одобрили су спровођење пилот испитивања у колибама у које су учествовали волонтери. Писмени информисани пристанак је добијен од свих волонтера пре учешћа у студији. Сви волонтери су добили бесплатну хемопрофилаксију како би смањили ризик од маларије, а медицинска сестра је била на дужности током целог испитивања да процени сваког добровољца који је развио симптоме грознице или нежељене реакције на испитивани производ.
Потпуни резултати из експерименталних колиба, који сумирају укупан број живих/мртвих, изгладњелих/крвљу храњених и плодних/стерилних комараца за сваку експерименталну групу, као и дескриптивна статистика представљени су као додатни материјал (Табела С1).
У експерименталној колиби у Кова, Бенин, потиснуто је храњење крвљу дивљих комараца Анопхелес гамбиае отпорних на пиретроиде. Подаци из нетретираних контрола и нових мрежа су обједињени у испитивањима да би се обезбедила јединствена процена ефикасности. Анализом логистичке регресије, колоне са заједничким словима нису се значајно разликовале на нивоу од 5% (п > 0,05). Траке грешака представљају интервале поверења од 95%.
Смртност дивљих комараца Анопхелес гамбиае отпорних на пиретроиде који улазе у експерименталну колибу у Кова, Бенин. Подаци из нетретираних контрола и нових мрежа су обједињени у испитивањима да би се обезбедила јединствена процена ефикасности. Анализом логистичке регресије, колоне са заједничким словима нису се значајно разликовале на нивоу од 5% (п > 0,05). Траке грешака представљају интервале поверења од 95%.
Однос шансе описује разлику у морталитету са мрежама за комарце нове генерације у поређењу са мрежама против комараца само са пиретроидима. Испрекидана линија представља однос шансе 1, што указује да нема разлике у морталитету. Однос шансе > 1 указује на већу смртност код мрежа против комараца нове генерације. Подаци за нове генерације мрежа против комараца су обједињени током испитивања како би се произвела једна процена ефикасности. Траке грешака представљају интервале поверења од 95%.
Иако је Интерцептор® показао најнижи морталитет од свих тестираних ИТН-ова, старење на терену није негативно утицало на његов утицај на морталитет вектора. У ствари, нови Интерцептор® је довео до 12% морталитета, док су мреже старе на терену показале благо побољшање након 12 месеци (17%, п=0,006) и 24 месеца (17%, п=0,004), пре него што су се вратиле на нивое сличне новим мрежама за 36 месеци (11%, п=0,05). Насупрот томе, стопе смртности за следећу генерацију мрежа третираних инсектицидима постепено су опадале током времена након постављања. Смањење је било најизраженије код Интерцептор® Г2, где је морталитет смањен са 58% са новим мрежама на 36% за 12 месеци (п< 0,001), 31% на 24 месеца (стр< 0,001) и 20% на 36 месеци (стр< 0,001). Нови ПермаНет® 3.0 је резултирао смањењем морталитета на 37%, што је такође значајно смањено на 20% након 12 месеци (п< 0,001), 16% на 24 месеца (стр< 0,001), и 18% на 36 месеци (стр< 0,001). Сличан тренд је примећен са Роиал Гуард®, са новом мрежом која је резултирала смањењем морталитета од 33%, након чега је уследило значајно смањење на 21% након 12 месеци (п< 0,001), 17% на 24 месеца (стр< 0,001) и 15% на 36 месеци (стр< 0,001).
Смањење плодности дивљих комараца Анопхелес гамбиае отпорних на пиретроиде који улазе у експерименталну колибу у Ква, Бенин. Подаци из нетретираних контрола и нових мрежа су обједињени у испитивањима да би се обезбедила јединствена процена ефикасности. Трагови са заједничким словима нису се значајно разликовали на нивоу од 5% (п > 0,05) анализом логистичке регресије. Траке грешака представљају интервале поверења од 95%.
Односи шанси описују разлику у плодности са мрежама за комарце нове генерације у поређењу са мрежама против комараца само са пиретроидима. Испрекидана линија представља однос 1, што указује да нема разлике у плодности. Односи шансе< 1 указује на веће смањење плодности са мрежама нове генерације. Подаци за нове генерације мрежа против комараца су обједињени током испитивања како би се произвела једна процена ефикасности. Траке грешака представљају интервале поверења од 95%.
Време поста: 17. фебруар 2025