Хвала вам што сте посетили Натуре.цом.Верзија претраживача коју користите има ограничену подршку за ЦСС.За најбоље резултате препоручујемо да користите новију верзију прегледача (или онемогућите режим компатибилности у Интернет Екплорер-у).У међувремену, да бисмо обезбедили сталну подршку, приказујемо сајт без стила или ЈаваСцрипт-а.
Комбинације инсектицидних једињења биљног порекла могу да испоље синергистичке или антагонистичке интеракције против штеточина.С обзиром на брзо ширење болести које преносе Аедес комарци и све већу отпорност популација комараца Аедес на традиционалне инсектициде, формулисано је двадесет осам комбинација терпенских једињења на бази биљних етеричних уља и тестирано против ларве и одраслих стадијума Аедес аегипти.Пет биљних етеричних уља (ЕО) је првобитно процењено за њихову ларвицидну ефикасност и ефикасност за употребу код одраслих, а два главна једињења су идентификована у сваком ЕО на основу резултата ГЦ-МС.Набављена су главна идентификована једињења, а то су диалил дисулфид, диалил трисулфид, карвон, лимонен, еугенол, метил еугенол, еукалиптол, еудесмол и комарац алфа-пинен.Бинарне комбинације ових једињења су затим припремљене коришћењем сублеталних доза и њихови синергистички и антагонистички ефекти су тестирани и утврђени.Најбоље ларвицидне композиције добијају се мешањем лимонена са диалил дисулфидом, а најбоље адултицидне композиције добијају се мешањем карвона са лимоненом.Комерцијално коришћени синтетички ларвицид Темпхос и лек за одрасле Малатион су тестирани одвојено иу бинарним комбинацијама са терпеноидима.Резултати су показали да је комбинација темефоса и диалил дисулфида и малатиона и еудесмола најефикаснија.Ове моћне комбинације имају потенцијал за употребу против Аедес аегипти.
Биљна етерична уља (ЕО) су секундарни метаболити који садрже различита биоактивна једињења и постају све важнија као алтернатива синтетичким пестицидима.Не само да су еколошки прихватљиви и лаки за употребу, већ су и мешавина различитих биоактивних једињења, што такође смањује вероватноћу развоја резистенције на лекове1.Користећи ГЦ-МС технологију, истраживачи су испитали састојке различитих биљних етеричних уља и идентификовали више од 3.000 једињења из 17.500 ароматичних биљака2, од којих је већина тестирана на инсектицидна својства и пријављено је да имају инсектицидне ефекте3,4.Неке студије наглашавају да је токсичност главне компоненте једињења иста или већа од токсичности његовог сировог етилен оксида.Али употреба појединачних једињења може опет оставити простора за развој резистенције, као што је случај са хемијским инсектицидима5,6.Стога је тренутни фокус на припреми смеша једињења на бази етилен оксида да би се побољшала инсектицидна ефикасност и смањила вероватноћа отпорности у циљним популацијама штеточина.Појединачна активна једињења присутна у ЕО могу да испоље синергистичке или антагонистичке ефекте у комбинацијама које одражавају укупну активност ЕО, што је чињеница која је добро наглашена у студијама које су спровели претходни истраживачи7,8.Програм векторске контроле такође укључује ЕО и његове компоненте.Дејство есенцијалних уља против комараца је опширно проучавано на Цулек и Анопхелес комарцима.Неколико студија је покушало да развију ефикасне пестициде комбиновањем различитих биљака са комерцијално коришћеним синтетичким пестицидима како би се повећала укупна токсичност и минимизирали нежељени ефекти9.Али студије таквих једињења против Аедес аегипти остају ретке.Напредак медицинске науке и развој лекова и вакцина помогли су у борби против неких векторских болести.Али присуство различитих серотипова вируса, које преноси комарац Аедес аегипти, довело је до неуспеха програма вакцинације.Стога, када се појаве такве болести, програми контроле вектора су једина опција за спречавање ширења болести.У садашњем сценарију, контрола Аедес аегипти је веома важна јер је он кључни вектор разних вируса и њихових серотипова који изазивају денга грозницу, зика, денга хеморагичну грозницу, жуту грозницу итд. Најважнија ствар је чињеница да је број случајеви скоро свих векторских болести које се преносе Аедесом расту сваке године у Египту и расту широм света.Стога, у овом контексту, постоји хитна потреба да се развију еколошки прихватљиве и ефикасне мере контроле за популацију Аедес аегипти.Потенцијални кандидати у овом погледу су ЕО, њихова саставна једињења и њихове комбинације.Стога је ова студија покушала да идентификује ефикасне синергистичке комбинације кључних биљних ЕО једињења из пет биљака са инсектицидним својствима (тј. нана, босиљак, пегави еукалиптус, Аллиум сумпор и мелалеуца) против Аедес аегипти.
Сви одабрани ЕО су показали потенцијалну ларвицидну активност против Аедес аегипти са 24-часовним ЛЦ50 у распону од 0,42 до 163,65 ппм.Највећа ларвицидна активност забележена је за ЕО пеперминт (Мп) са ЛЦ50 вредношћу од 0,42 ппм за 24 х, а затим за бели лук (Ас) са вредношћу ЛЦ50 од 16,19 ппм за 24 х (Табела 1).
Са изузетком Оцимум Саинттум, Ос ЕО, сва остала четири тестирана ЕО су показала очигледне алерцидне ефекте, са вредностима ЛЦ50 у распону од 23,37 до 120,16 ппм током периода излагања од 24 сата.Тхимопхилус стриата (Цл) ЕО је био најефикаснији у убијању одраслих особа са ЛЦ50 вредношћу од 23,37 ппм у року од 24 сата од излагања, праћен Еуцалиптус мацулата (Ем) који је имао ЛЦ50 вредност од 101,91 ппм (Табела 1).С друге стране, вредност ЛЦ50 за Ос још није утврђена јер је највећа стопа морталитета од 53% забележена при највишој дози (додатна слика 3).
Два главна саставна једињења у сваком ЕО су идентификована и одабрана на основу резултата базе података НИСТ библиотеке, процента површине ГЦ хроматограма и резултата МС спектра (Табела 2).За ЕО Ас, главна идентификована једињења су била диалил дисулфид и диалил трисулфид;за ЕО Мп главна идентификована једињења су карвон и лимонен, за ЕО Ем главна идентификована једињења су еудесмол и еукалиптол;За ЕО Ос, главна идентификована једињења су еугенол и метил еугенол, а за ЕО Цл, главна идентификована једињења су еугенол и α-пинен (Слика 1, Додатне слике 5–8, Додатна табела 1–5).
Резултати масене спектрометрије главних терпеноида одабраних етеричних уља (А-диалил дисулфид; Б-диалил трисулфид; Ц-еугенол; Д-метил еугенол; Е-лимонен; Ф-ароматични цеперон; Г-α-пинен; Х-цинеол Р-еудамол).
Укупно девет једињења (дијалил дисулфид, диалил трисулфид, еугенол, метил еугенол, карвон, лимонен, еукалиптол, еудесмол, α-пинен) идентификовано је као ефикасна једињења која су главне компоненте ЕО и која су појединачно биолошки тестирана против Аедес а. фазе..Једињење еудесмол је имало највећу ларвицидну активност са ЛЦ50 вредношћу од 2,25 ппм након 24 сата излагања.Такође је откривено да једињења диалил дисулфид и диалил трисулфид имају потенцијалне ларвицидне ефекте, са средњим сублеталним дозама у опсегу од 10-20 ппм.Умерена ларвицидна активност поново је примећена за једињења еугенол, лимонен и еукалиптол са вредностима ЛЦ50 од 63,35 ппм, 139,29 ппм.и 181,33 ппм после 24 сата, респективно (табела 3).Међутим, ни при највећим дозама није пронађен значајан ларвицидни потенцијал метил еугенола и карвона, тако да вредности ЛЦ50 нису израчунате (Табела 3).Синтетички ларвицид Темефос имао је средњу смртоносну концентрацију од 0,43 ппм против Аедес аегипти током 24 сата излагања (Табела 3, Додатна табела 6).
Седам једињења (дијалил дисулфид, диалил трисулфид, еукалиптол, α-пинен, еудесмол, лимонен и карвон) идентификовано је као главна једињења ефикасног ЕО и појединачно су тестирана против одраслих египатских Аедес комараца.Према Пробит регресионој анализи, утврђено је да Еудесмол има највећи потенцијал са ЛЦ50 вредношћу од 1,82 ппм, а затим следи Еуцалиптол са ЛЦ50 вредношћу од 17,60 ппм при 24-часовном времену излагања.Преосталих пет тестираних једињења било је умерено штетно за одрасле са ЛЦ50 у распону од 140,79 до 737,01 ппм (Табела 3).Синтетички органофосфорни малатион био је мање потентан од еудесмола и виши од осталих шест једињења, са вредношћу ЛЦ50 од 5,44 ппм током 24-часовног периода излагања (табела 3, додатна табела 6).
Седам моћних једињења олова и органофосфорни тамефосат су одабрани да формулишу бинарне комбинације њихових ЛЦ50 доза у односу 1:1.Укупно 28 бинарних комбинација је припремљено и тестирано на њихову ларвицидну ефикасност против Аедес аегипти.Утврђено је да је девет комбинација било синергистичко, 14 комбинација је било антагонистичко, а пет комбинација није било ларвицидно.Међу синергистичким комбинацијама, комбинација диалил дисулфида и темофола је била најефикаснија, са 100% морталитетом забележеним након 24 сата (Табела 4).Слично, мешавине лимонена са диалил дисулфидом и еугенола са тимефосом су показале добар потенцијал са уоченим морталитетом ларви од 98,3% (Табела 5).Преостале 4 комбинације, односно еудесмол плус еукалиптол, еудесмол плус лимонен, еукалиптол плус алфа-пинен, алфа-пинен плус темефос, такође су показале значајну ларвицидну ефикасност, са уоченим стопама морталитета преко 90%.Очекивана стопа морталитета је близу 60-75%.(Табела 4).Међутим, комбинација лимонена са α-пиненом или еукалиптусом показала је антагонистичке реакције.Слично, нађено је да мешавине Темефоса са еугенолом или еукалиптусом или еудесмолом или диалил трисулфидом имају антагонистичке ефекте.Слично, комбинација диалил дисулфида и диалил трисулфида и комбинација било ког од ових једињења са еудесмолом или еугенолом су антагонистички у свом ларвицидном деловању.Антагонизам је такође пријављен са комбинацијом еудесмола са еугенолом или α-пиненом.
Од свих 28 бинарних смеша тестираних на киселу активност одраслих, 7 комбинација је било синергистичко, 6 није имало ефекта, а 15 је било антагонистичких.Утврђено је да су смеше еудесмола са еукалиптусом и лимонена са карвоном ефикасније од других синергистичких комбинација, са стопом морталитета за 24 сата од 76% и 100%, респективно (Табела 5).Примећено је да малатион испољава синергистички ефекат са свим комбинацијама једињења осим лимонена и диалил трисулфида.С друге стране, пронађен је антагонизам између диалил дисулфида и диалил трисулфида и комбинације било којег од њих са еукалиптусом, или еукалиптолом, или карвоном, или лимоненом.Слично, комбинације α-пинена са еудесмолом или лимоненом, еукалиптола са карвоном или лимоненом и лимонена са еудесмолом или малатионом показале су антагонистичке ларвицидне ефекте.За преосталих шест комбинација није било значајне разлике између очекиваног и уоченог морталитета (Табела 5).
На основу синергијских ефеката и сублеталних доза, њихова ларвицидна токсичност против великог броја комараца Аедес аегипти је на крају одабрана и даље тестирана.Резултати су показали да је посматрани морталитет ларви применом бинарних комбинација еугенол-лимонен, диалил дисулфид-лимонен и диалил дисулфид-тимефос износио 100%, док је очекивани морталитет ларви био 76,48%, 72,16% и 63,4% Т, респективно ()..Комбинација лимонена и еудесмола била је релативно мање ефикасна, са 88% морталитета ларви уоченог током 24-часовног периода излагања (Табела 6).Укратко, четири одабране бинарне комбинације су такође показале синергистичке ларвицидне ефекте против Аедес аегипти када се примењују у великим размерама (Табела 6).
Три синергистичке комбинације су одабране за биолошки тест за одрасле за контролу великих популација одраслих Аедес аегипти.Да бисмо одабрали комбинације за тестирање на великим колонијама инсеката, прво смо се фокусирали на две најбоље синергистичке комбинације терпена, наиме карвон плус лимонен и еукалиптол плус еудесмол.Друго, најбоља синергистичка комбинација је изабрана из комбинације синтетичког органофосфатног малатиона и терпеноида.Верујемо да је комбинација малатиона и еудесмола најбоља комбинација за тестирање на великим колонијама инсеката због највећег уоченог морталитета и веома ниских ЛЦ50 вредности састојака кандидата.Малатион испољава синергизам у комбинацији са α-пиненом, диалил дисулфидом, еукалиптусом, карвоном и еудесмолом.Али ако погледамо вредности ЛЦ50, Еудесмол има најнижу вредност (2,25 ппм).Израчунате ЛЦ50 вредности малатиона, α-пинена, диалил дисулфида, еукалиптола и карвона биле су 5,4, 716,55, 166,02, 17,6 и 140,79 ппм.редом.Ове вредности указују на то да је комбинација малатиона и еудесмола оптимална комбинација у погледу дозирања.Резултати су показали да су комбинације карвона плус лимонена и еудесмола плус малатиона имале 100% уочену смртност у поређењу са очекиваном смртношћу од 61% до 65%.Друга комбинација, еудесмол плус еукалиптол, показала је стопу морталитета од 78,66% након 24 сата излагања, у поређењу са очекиваном стопом морталитета од 60%.Све три одабране комбинације показале су синергистичке ефекте чак и када су примењене у великим размерама против одраслих Аедес аегипти (Табела 6).
У овој студији, одабрани биљни ЕО као што су Мп, Ас, Ос, Ем и Цл показали су обећавајуће смртоносне ефекте на ларве и одрасле фазе Аедес аегипти.Мп ЕО је имао највећу ларвицидну активност са ЛЦ50 вредношћу од 0,42 ппм, а затим Ас, Ос и Ем ЕО са вредношћу ЛЦ50 мањом од 50 ппм након 24 х.Ови резултати су у складу са претходним студијама комараца и других двокрилних мува10,11,12,13,14.Иако је ларвицидна моћ Цл нижа од осталих етеричних уља, са ЛЦ50 вредношћу од 163,65 ппм након 24 сата, његов потенцијал за одрасле је највећи са вредношћу ЛЦ50 од 23,37 ппм након 24 сата.Мп, Ас и Ем ЕО су такође показали добар алерцидни потенцијал са вредностима ЛЦ50 у опсегу од 100–120 ппм при 24 х изложености, али су били релативно нижи од њихове ларвицидне ефикасности.С друге стране, ЕО Ос је показао занемарљив алерцидни ефекат чак и при највишој терапијској дози.Дакле, резултати показују да токсичност етилен оксида за биљке може варирати у зависности од развојне фазе комараца15.Такође зависи од брзине продирања ЕО у тело инсекта, њихове интеракције са специфичним циљним ензимима и капацитета детоксикације комарца у свакој развојној фази16.Велики број студија је показао да је главна компонента једињења важан фактор у биолошкој активности етилен оксида, јер чини већину укупних једињења3,12,17,18.Стога смо размотрили два главна једињења у сваком ЕО.На основу резултата ГЦ-МС, диалил дисулфид и диалил трисулфид су идентификовани као главна једињења ЕО Ас, што је у складу са претходним извештајима19,20,21.Иако су претходни извештаји указивали да је ментол једно од његових главних једињења, карвон и лимонен су поново идентификовани као главна једињења Мп ЕО22,23.Профил састава Ос ЕО показао је да су еугенол и метил еугенол главна једињења, што је слично налазима ранијих истраживача16,24.Еукалиптол и еукалиптол су пријављени као главна једињења присутна у уљу листова Ем, што је у складу са налазима неких истраживача25,26 али супротно налазима Олаладеа ет ал.27.Доминација цинеола и α-пинена уочена је у етарског уља мелалеуке, што је слично претходним студијама28,29.Пријављене су интраспецифичне разлике у саставу и концентрацији етеричних уља екстрахованих из истих биљних врста на различитим локацијама, а такође су уочене у овој студији, на које утичу географски услови раста биљака, време жетве, развојна фаза или старост биљке.појава хемотипова итд.22,30,31,32.Кључна идентификована једињења су затим купљена и тестирана на њихове ларвицидне ефекте и ефекте на одрасле комарце Аедес аегипти.Резултати су показали да је ларвицидна активност диалил дисулфида упоредива са оном сировог ЕО Ас.Али активност диалил трисулфида је већа од ЕО Ас.Ови резултати су слични онима које су добили Кимбарис ет ал.33 на Цулек филипини.Међутим, ова два једињења нису показала добру аутоцидну активност против циљаних комараца, што је у складу са резултатима Плата-Руеда ет ал 34 на Тенебрио молитор.Ос ЕО је ефикасан против стадијума ларве Аедес аегипти, али не и против стадијума одрасле особе.Утврђено је да је ларвицидна активност главних појединачних једињења нижа од оне код сировог Ос ЕО.Ово имплицира улогу других једињења и њихових интеракција у сировом етилен оксиду.Сам метил еугенол има занемарљиву активност, док сам еугенол има умерену ларвицидну активност.Овај закључак потврђује, с једне стране,35,36, ас друге стране, противречи закључцима ранијих истраживача37,38.Разлике у функционалним групама еугенола и метилеугенола могу довести до различите токсичности за исти циљни инсект39.Утврђено је да лимонен има умерену ларвицидну активност, док је ефекат карвона био безначајан.Слично томе, релативно ниска токсичност лимонена за одрасле инсекте и висока токсичност карвона подржавају резултате неких претходних студија40, али су у супротности са другима41.Присуство двоструких веза и на интрацикличним и на егзоцикличним позицијама може повећати предности ових једињења као ларвицида3,41, док карвон, који је кетон са незасићеним алфа и бета угљеницима, може показати већи потенцијал за токсичност код одраслих42.Међутим, индивидуалне карактеристике лимонена и карвона су много ниже од укупног ЕО Мп (Табела 1, Табела 3).Међу тестираним терпеноидима, утврђено је да еудесмол има највећу ларвицидну активност и активност одраслих са вредношћу ЛЦ50 испод 2,5 ппм, што га чини обећавајућим једињењем за контролу комараца Аедес.Његов учинак је бољи од целог ЕО Ем, иако то није у складу са налазима Цхенг ет ал.40.Еудесмол је сесквитерпен са две јединице изопрена који је мање испарљив од монотерпена са кисеоником као што је еукалиптус и стога има већи потенцијал као пестицид.Сам еукалиптол има већу активност код одраслих него код ларвицида, а резултати ранијих студија то подржавају и побијају37,43,44.Сама активност је скоро упоредива са активношћу целог ЕО Цл.Други бициклични монотерпен, α-пинен, има мањи ефекат код одраслих на Аедес аегипти него ларвицидни ефекат, што је супротно од ефекта пуног ЕО Цл.На укупну инсектицидну активност терпеноида утичу њихова липофилност, испарљивост, гранање угљеника, површина пројекције, површина, функционалне групе и њихов положај45,46.Ова једињења могу деловати тако што уништавају акумулације ћелија, блокирају респираторну активност, прекидају пренос нервних импулса, итд. 47 Утврђено је да синтетички органофосфат Темефос има највећу ларвицидну активност са ЛЦ50 вредношћу од 0,43 ппм, што је у складу са Лековим подацима - Утала48.Активност синтетичког органофосфорног малатиона одраслих је пријављена на 5,44 ппм.Иако су ова два органофосфата показала повољан одговор против лабораторијских сојева Аедес аегипти, отпорност комараца на ова једињења је пријављена у различитим деловима света49.Међутим, нису пронађени слични извештаји о развоју резистенције на биљне лекове50.Стога се ботанички производи сматрају потенцијалном алтернативом хемијским пестицидима у програмима контроле вектора.
Ларвицидни ефекат је тестиран на 28 бинарних комбинација (1:1) припремљених од потентних терпеноида и терпеноида са тимефосом, а за 9 комбинација је утврђено да су синергистички, 14 антагонистички и 5 антагонистички.Без ефекта.С друге стране, у биолошком тесту потенције код одраслих, утврђено је да је 7 комбинација синергистичко, 15 комбинација је било антагонистичко, а пријављено је да 6 комбинација нема ефекта.Разлог зашто одређене комбинације производе синергистички ефекат може бити због тога што кандидатска једињења истовремено интерагују на различитим важним путевима, или у секвенцијалној инхибицији различитих кључних ензима одређеног биолошког пута51.Утврђено је да је комбинација лимонена са диалил дисулфидом, еукалиптусом или еугенолом синергистичка у малим и великим апликацијама (Табела 6), док је утврђено да њена комбинација са еукалиптусом или α-пиненом има антагонистичке ефекте на ларве.У просеку се чини да је лимонен добар синергист, вероватно због присуства метил група, доброг продирања у стратум цорнеум и другачијег механизма деловања52,53.Раније је пријављено да лимонен може изазвати токсичне ефекте продирањем у кутикуле инсеката (токсичност контакта), утицајем на систем за варење (антифеедант) или утицајем на респираторни систем (активност фумигације), 54 док фенилпропаноиди као што је еугенол могу утицати на метаболичке ензиме 55. Стога, комбинације једињења са различитим механизмима деловања могу повећати укупан смртоносни ефекат смеше.Утврђено је да је еукалиптол синергичан са диалил дисулфидом, еукалиптусом или α-пиненом, али друге комбинације са другим једињењима нису биле ларвицидне или антагонистичке.Ране студије су показале да еукалиптол има инхибиторну активност на ацетилхолинестеразу (АЦхЕ), као и на октааминске и ГАБА рецепторе56.Пошто циклични монотерпени, еукалиптол, еугенол, итд. могу имати исти механизам деловања као и њихова неуротоксична активност, 57 чиме се минимизирају њихови комбиновани ефекти кроз међусобну инхибицију.Слично, утврђено је да је комбинација Темефоса са диалил дисулфидом, α-пиненом и лимоненом синергистичка, што подржава претходне извештаје о синергистичком ефекту између биљних производа и синтетичких органофосфата58.
Утврђено је да комбинација еудесмола и еукалиптола има синергистички ефекат на стадијуме ларве и одрасле јединке Аедес аегипти, вероватно због њиховог различитог начина деловања због њихове различите хемијске структуре.Еудесмол (сесквитерпен) може да утиче на респираторни систем 59 а еукалиптол (монотерпен) може да утиче на ацетилхолинестеразу 60 .Заједничко излагање састојака на два или више циљних места може повећати укупни смртоносни ефекат комбинације.У биолошким тестовима супстанци за одрасле, утврђено је да је малатион синергичан са карвоном или еукалиптолом или еукалиптолом или диалил дисулфидом или α-пиненом, што указује да је синергичан са додатком лимонена и ди.Добри синергистички алерцидни кандидати за цео портфолио терпенских једињења, са изузетком алил трисулфида.Тхангам и Катхиресан61 су такође известили о сличним резултатима синергистичког ефекта малатиона са биљним екстрактима.Овај синергистички одговор може бити последица комбинованих токсичних ефеката малатиона и фитокемикалија на ензиме за детоксикацију инсеката.Органофосфати као што је малатион генерално делују тако што инхибирају естеразе и монооксигеназе цитокрома П45062,63,64.Стога, комбиновање малатиона са овим механизмима деловања и терпена са различитим механизмима деловања може побољшати укупан смртоносни ефекат на комарце.
С друге стране, антагонизам указује да су одабрана једињења мање активна у комбинацији него свако једињење појединачно.Разлог за антагонизам у неким комбинацијама може бити тај што једно једињење модификује понашање другог једињења променом брзине апсорпције, дистрибуције, метаболизма или излучивања.Рани истраживачи су сматрали да је то узрок антагонизма у комбинацијама лекова.Молекули Могући механизам 65. Слично томе, могући узроци антагонизма могу бити повезани са сличним механизмима деловања, конкуренцијом саставних једињења за исти рецептор или циљно место.У неким случајевима може доћи и до неконкурентне инхибиције циљног протеина.У овој студији, два органосумпорна једињења, диалил дисулфид и диалил трисулфид, показала су антагонистичке ефекте, вероватно због конкуренције за исто циљно место.Слично, ова два једињења сумпора су показала антагонистичке ефекте и нису имала ефекта када су комбинована са еудесмолом и α-пиненом.Еудесмол и алфа-пинен су цикличне природе, док су диалил дисулфид и диалил трисулфид алифатске природе.На основу хемијске структуре, комбинација ових једињења би требало да повећа укупну смртоносну активност пошто су њихова циљна места обично различита34,47, али смо експериментално открили антагонизам, што може бити последица улоге ових једињења у неким непознатим организмима ин виво.система као резултат интеракције.Слично, комбинација цинеола и α-пинена је произвела антагонистичке одговоре, иако су истраживачи раније известили да ова два једињења имају различите циљеве деловања47,60.Пошто су оба једињења циклични монотерпени, могу постојати нека заједничка циљна места која се могу такмичити за везивање и утицати на укупну токсичност комбинаторних парова који су проучавани.
На основу вредности ЛЦ50 и уоченог морталитета, изабране су две најбоље синергистичке комбинације терпена, и то парови карвон + лимонен и еукалиптол + еудесмол, као и синтетички органофосфорни малатион са терпенима.Оптимална синергистичка комбинација једињења малатион + Еудесмол је тестирана у биолошком тесту инсектицида за одрасле.Циљајте на велике колоније инсеката да бисте потврдили да ли ове ефикасне комбинације могу да делују против великог броја појединаца у релативно великим просторима изложености.Све ове комбинације показују синергистички ефекат против великих ројева инсеката.Слични резултати су добијени за оптималну синергистичку ларвицидну комбинацију тестирану против великих популација ларви Аедес аегипти.Стога се може рећи да је ефикасна синергистичка ларвицидна и адултицидна комбинација биљних ЕО једињења снажан кандидат против постојећих синтетичких хемикалија и да се може даље користити за контролу популација Аедес аегипти.Слично, ефикасне комбинације синтетичких ларвицида или адултицида са терпенима се такође могу користити за смањење доза тимефоса или малатиона који се дају комарцима.Ове моћне синергистичке комбинације могу пружити решења за будуће студије о еволуцији резистенције на лекове код комараца Аедес.
Јаја Аедес аегипти су сакупљена из Регионалног центра за медицинска истраживања, Дибругарх, Индијски савет за медицинска истраживања и држана на контролисаној температури (28 ± 1 °Ц) и влажности (85 ± 5%) на Одељењу за зоологију Универзитета Гаухати у оквиру следећи услови: Ариволи су описани и сар.Након излегања, ларве су храњене храном за ларве (псећи бисквит у праху и квасац у односу 3:1), а одрасли су храњени 10% раствором глукозе.Почевши од 3. дана након ницања, одраслим женкама комараца је дозвољено да сишу крв албино пацова.Намочите филтер папир у воду у чаши и ставите је у кавез за полагање јаја.
Одабрани узорци биљака и то листови еукалиптуса (Миртацеае), свети босиљак (Ламиацеае), нана (Ламиацеае), мелалеука (Миртацеае) и луковице алијума (Амариллидацеае).Прикупљено из Гувахатија и идентификовано од стране Одељења за ботанику Универзитета Гаухати.Сакупљени биљни узорци (500 г) су подвргнути хидродестилацији коришћењем Цлевенгер апарата током 6 сати.Екстраховани ЕО је сакупљен у чисте стаклене бочице и чуван на 4°Ц за даље проучавање.
Ларвицидна токсичност је проучавана коришћењем мало модификованих стандардних процедура Светске здравствене организације 67 .Користите ДМСО као емулгатор.Свака концентрација ЕО је првобитно тестирана на 100 и 1000 ппм, излажући 20 ларви у свакој реплици.На основу резултата примењен је опсег концентрације и забележен је морталитет од 1 сата до 6 сати (у интервалима од 1 сата), те 24 сата, 48 сати и 72 сата након третмана.Сублеталне концентрације (ЛЦ50) су одређене након 24, 48 и 72 сата излагања.Свака концентрација је анализирана у три примерка заједно са једном негативном контролом (само вода) и једном позитивном контролом (вода третирана ДМСО).Ако дође до пупације и угине више од 10% ларви контролне групе, експеримент се понавља.Ако је стопа морталитета у контролној групи између 5-10%, користите Абботтову формулу корекције 68.
Метода коју су описали Рамар ет ал.69 је коришћен за биолошки тест за одрасле против Аедес аегипти користећи ацетон као растварач.Сваки ЕО је првобитно тестиран против одраслих Аедес аегипти комараца у концентрацијама од 100 и 1000 ппм.Нанесите 2 мл сваког припремљеног раствора на Вхатман број.1 комад филтер папира (величине 12 к 15 цм2) и оставити да ацетон испари 10 минута.Као контрола коришћен је филтер папир третиран са само 2 мл ацетона.Након што је ацетон испарио, третирани филтер папир и контролни филтер папир се стављају у цилиндричну цев (дубине 10 цм).Десет комараца старих 3 до 4 дана који се не хране крвљу пребачени су у три примерка сваке концентрације.На основу резултата прелиминарних испитивања испитиване су различите концентрације одабраних уља.Смртност је забележена 1 сат, 2 сата, 3 сата, 4 сата, 5 сати, 6 сати, 24 сата, 48 сати и 72 сата након пуштања комараца.Израчунајте вредности ЛЦ50 за време излагања од 24 сата, 48 сати и 72 сата.Ако стопа морталитета контролне партије прелази 20%, поновите цео тест.Слично, ако је стопа морталитета у контролној групи већа од 5%, прилагодите резултате за третиране узорке користећи Абботтову формулу68.
Урађене су гасна хроматографија (Агилент 7890А) и масена спектрометрија (Аццу ТОФ ГЦв, Јеол) за анализу саставних једињења одабраних етеричних уља.ГЦ је опремљен ФИД детектором и капиларном колоном (ХП5-МС).Гас носач је био хелијум, брзина протока је била 1 мл/мин.ГЦ програм поставља Аллиум сативум на 10:80-1М-8-220-5М-8-270-9М и Оцимум Саинттум на 10:80-3М-8-200-3М-10-275-1М-5 – 280, за менту 10:80-1М-8-200-5М-8-275-1М-5-280, за еукалиптус 20,60-1М-10-200-3М-30-280, а за црвену За хиљаду слојева то су они 10: 60-1М-8-220-5М-8-270-3М.
Главна једињења сваког ЕО-а су идентификована на основу процента површине израчунате из ГЦ хроматограма и резултата масене спектрометрије (позивајући се на базу података стандарда НИСТ 70).
Два главна једињења у сваком ЕО одабрана су на основу ГЦ-МС резултата и купљена од Сигма-Алдрицх са чистоћом од 98–99% за даље биотестове.Једињења су тестирана на ларвицидну и ефикасност код одраслих против Аедес аегипти као што је горе описано.Најчешће коришћени синтетички ларвицид тамефосат (Сигма Алдрицх) и лек за одрасле малатион (Сигма Алдрицх) анализирани су да би се упоредила њихова ефикасност са одабраним ЕО једињењима, по истој процедури.
Бинарне смеше одабраних једињења терпена и једињења терпена плус комерцијални органофосфати (тилепос и малатион) су припремљене мешањем ЛЦ50 дозе сваког кандидата једињења у односу 1:1.Припремљене комбинације су тестиране на ларвалном и одраслом стадијуму Аедес аегипти као што је горе описано.Сваки биолошки тест је изведен у три примерка за сваку комбинацију и у три примерка за појединачна једињења присутна у свакој комбинацији.Смрт циљних инсеката забележена је након 24 сата.Израчунајте очекивану стопу морталитета за бинарну смешу користећи следећу формулу.
где је Е = очекивана стопа морталитета Аедес аегипти комараца као одговор на бинарну комбинацију, односно везу (А + Б).
Ефекат сваке бинарне смеше је означен као синергистички, антагонистички или никакав ефекат на основу вредности χ2 израчунате методом коју је описао Павла52.Израчунајте вредност χ2 за сваку комбинацију користећи следећу формулу.
Ефекат комбинације је дефинисан као синергистички када је израчуната вредност χ2 већа од вредности у табели за одговарајуће степене слободе (95% интервал поверења) и ако је утврђено да уочени морталитет премашује очекивани морталитет.Слично, ако израчуната вредност χ2 за било коју комбинацију премашује табелу са одређеним степеном слободе, али је уочени морталитет нижи од очекиваног морталитета, третман се сматра антагонистичким.А ако је у било којој комбинацији израчуната вредност χ2 мања од вредности у табели у одговарајућим степенима слободе, сматра се да комбинација нема ефекта.
Одабране су три до четири потенцијално синергијске комбинације (100 ларви и 50 ларвицидне активности и активности одраслих инсеката) за тестирање против великог броја инсеката.Одрасли) поступите као горе.Поред мешавина, појединачна једињења присутна у одабраним смешама су такође тестирана на једнаком броју ларви Аедес аегипти и одраслих јединки.Комбинациони однос је један део ЛЦ50 дозе једног једињења кандидата и део ЛЦ50 дозе другог конституентног једињења.У биолошком тесту активности одраслих, одабрана једињења су растворена у растварачу ацетону и нанета на филтер папир умотан у цилиндрични пластични контејнер од 1300 цм3.Ацетон је упарен 10 минута и одрасли су пуштени.Слично, у ларвицидном биолошком тесту, дозе једињења кандидата ЛЦ50 су прво растворене у једнаким запреминама ДМСО, а затим помешане са 1 литром воде ускладиштене у пластичним посудама од 1300 цц, и ларве су пуштене.
Пробабилистичка анализа 71 забележеног податка о морталитету је извршена коришћењем СПСС (верзија 16) и Минитаб софтвера за израчунавање вредности ЛЦ50.
Време поста: Јул-01-2024